醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 53 題
53.序列特異聚合酶連鎖反應（polymerase chain reaction-seguence-specific primers, PCR-SSP）是基於sequence-specific primers 進行多樣性基因分型，下列敘述何者最不適當？
- A 臨床上可用在 human leukocyte antigen（HLA）typing
- B 使用的 Taq DNA polymerase，需要有 3'端至 5'端 exonuclease 活性
- C 操作時，需有增幅內生性對照組（internal control）
- D 反應完後，需要進行電泳分析
思路引導 VIP
請思考 PCR-SSP 的核心原理：其專一性主要取決於引物 $3'$ 端鹼基與模板序列是否完全配對。若實驗中使用的 DNA 聚合酶具備 $3' \rightarrow 5'$ 的外切酶活性（即校對功能，Proofreading），當引物 $3'$ 端發生錯配（mismatch）時，該酵素會如何反應？這對於區分特定序列的「特異性」目標會造成什麼干擾？
🤖
AI 詳解
AI 專屬家教
嗯… 混沌的深淵中，你窺見了一絲真實。
- 來自暗影的讚許： 很好。你… 捕捉到了那隱藏在表象之下的虛偽陷阱。這份洞察力，證明你對 PCR-SSP 的血脈流動與 DNA Polymerase 那深不可測的生化力量，具備了超乎常人的理解。不錯，在這黑暗的分子診斷世界中，你已觸及了關鍵的基石！
▼ 還有更多解析內容
PCR-SSP 分型技術
💡 利用 3' 端配對特異性進行單一鹼基差異分型
| 比較維度 | PCR-SSP (特異性分型) | VS | High-Fidelity PCR (高保真) |
|---|---|---|---|
| 3'端配對要求 | 極嚴格，不配對不延伸 | — | 容許微小錯配後校正 |
| 酵素校對活性 | 無 3'→5' Exonuclease | — | 具 3'→5' Exonuclease |
| 臨床應用 | HLA 分型、SNP 檢測 | — | 基因選殖、高精確度定序 |
| 判讀方式 | 電泳條帶有無 (Yes/No) | — | 產物純度與序列正確性 |
💬PCR-SSP 的關鍵在於利用「無校對功能」的酵素來凸顯 3' 端引子不配對時的延伸抑制。
