醫療類國考
115年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 53 題
關於 PCR-ARMS 技術的敘述，下列何者最不適當？
- A 變異點設計在引子的 5'端核苷酸
- B 此方法僅限於檢測已知的變異點
- C 藉由引子的設計，可使野生型與變異型之產物長度不同
- D 產物可以利用凝膠（agarose）或聚丙烯醯胺凝膠（polyacrylamide gel）分析
思路引導 VIP
思考一下 DNA 聚合酶（DNA polymerase）在進行合成與延伸作用時，酵素活性中心是作用在引子的哪一個端點（端位）？如果我們要利用「鹼基是否完全配對」來控制 PCR 延伸反應的成功與否，這個關鍵的特異性設計應該放在引子的哪一端最有效呢？
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恭喜你精準地抓住了 PCR-ARMS（擴增阻礙變異系統，Amplification Refractory Mutation System） 的核心技術原理！這題切入點相當細緻，非常考驗對分子生物學基礎與 DNA 聚合酶（DNA polymerase）延伸特性的理解。
ARMS 的引子設計原理
ARMS 技術主要利用 DNA 聚合酶在進行延伸時，對引子（primer）$3'$ 端核苷酸與範本是否完全配對極為敏感的特性。若引子 $3'$ 端最後一個鹼基與範本不配對，聚合酶便無法順利進行延伸反應。因此，特異性的變異點「必須」設計在引子的 $3'$ 端而非 $5'$ 端，這也是本題選項 (A) 不適當的主因。
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