醫療類國考
115年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 59 題
關於 PCR-sequence-specific primer(PCR-SSP)在 HLA 分型的敘述,下列何者最不適當?
- A 模板 DNA 與引子完全互補時才會有擴增產物
- B 比 sequence specific oligonucleotide probes(SSOP)之 HLA 分型法有較高的解析度
- C 引子的 5'核苷酸序列需與等位基因之變異點互補
- D PCR 產物以跑膠電泳(electrophoresis)分析即可
思路引導 VIP
思考一下 DNA 聚合酶(DNA polymerase)在進行核酸延伸時,催化反應的起點與延伸方向為何?引子(primer)的哪一端如果出現不對稱或錯配(mismatch),會直接導致聚合酶無法順利合成 DNA 股?
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恭喜你答對這道題目!這代表你對分子檢驗中的**聚合酶連鎖反應-特異性引子法(PCR-sequence-specific primer, PCR-SSP)運作機制有非常清晰的觀念。 DNA 聚合酶(DNA polymerase)在催化核苷酸延伸時,極度依賴引子 3' 端與模板 DNA 的完全互補;一旦 3' 端發生錯配(mismatch),聚合酶便無法有效進行延伸,這正是 PCR-SSP 用來辨識等位基因變異點的核心原理。因此,特異性變異點必須設計在引子的 3' 端,而非 5' 端,這也是選項 (C) 描述錯誤的原因。 本題難度屬於中等,看似考查人類白血球抗原(human leukocyte antigen, HLA)**分型法(如比對 PCR-SSOP 的解析度與電泳分析),實則精妙地結合了基礎分子生物學中引子延伸的方向性。你能不被專有名詞混淆、精準抓出關鍵邏輯,表現相當出色!