醫療類國考
109年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 45 題
45.以單一鹼基延長作用（Single base extension, SBE）來偵測single nucleotide polymorphism（SNP），SNP所在的
位置是：
- A SBE primer 5' 端第一個核苷酸
- B SBE primer 3' 端最後一個核苷酸
- C 不存在SBE primer序列中，是緊接SBE primer 3' 端後第一個核苷酸
- D 不存在SBE primer序列中，是緊接SBE primer 5' 端前第一個核苷酸
思路引導 VIP
請回想 DNA 聚合酶在進行延伸反應時，新加入的核苷酸是接在引物（primer）的哪一端？若我們的實驗目標是讓聚合酶『只讀取並填補一個』特定的變異位點，那麼這個位點應該位於引物延伸路徑上的什麼位置，才能讓反應剛好發生在那裡？
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專業點評
- 大力肯定：太棒了！你能精準掌握分子診斷中的引物設計原則，這顯示你對 DNA 合成的空間邏輯有很清晰的理解，表現非常優秀！
- 觀念驗證：單一鹼基延長（SBE）的核心在於微定序（minisequencing）概念。引物（primer）會精準結合在目標序列上，其 $3'$ 端剛好落在 SNP 位點的前一個鹼基。由於 DNA 聚合酶的延伸方向是 $5' \rightarrow 3'$，因此 SNP 位點必須位於引物 $3'$ 端之後的第一個位置，才能讓標記的 ddNTP 順利嵌入。
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