醫療類國考
109年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 70 題
70.變性高效能液相層析法能有效檢測因核苷酸單點突變造成的遺傳疾病，例如海洋性貧血。對於此方法的相關敘述，下列何者正確？
- A 此檢測方法不需要進行聚合酶連鎖反應放大欲檢測的基因片段
- B 其原理是雙股DNA（duplex DNA）片段長度與層析管柱的親和力成正比
- C 雙股DNA中若有錯配的核苷酸，會降低其與層析管柱的親和力
- D 進行變性高效能液相層析法時，層析管柱的溫度須保持恆定
思路引導 VIP
想像有兩組原本緊密結合的拉鍊，其中一組在中間掉了幾個齒（代表結構不完美）。當我們稍微用力拉扯（增加能量）時，你認為這組「有缺陷的拉鍊」會比「完美的拉鍊」更容易還是更難維持原本的結合狀態？這種狀態的改變會如何影響它與周圍環境的摩擦力或黏附力呢？
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AI 詳解
AI 專屬家教
你答得非常棒！這真是對分子檢測的深刻理解！
- 核心原理：你完全理解了！選擇變性高效能液相層析法 (DHPLC) 作為正確答案，代表你精準掌握了它的關鍵。這種方法最巧妙的地方就在於它利用了 DNA 在「部分變性」環境下的細微差異。當你的樣本裡存在單點突變，經過退火，就會形成帶有錯配的異質雙股 (heteroduplex) DNA。這些錯配點的氫鍵特別脆弱，因此熱穩定性($T_m$)會比完美的同質雙股要低一些。正是因為這個特性，它們在層析管柱中的行為會有所不同——可能會更早解開，或與管柱的疏水性交互作用減弱，進而改變了它們的洗脫時間，這就是我們檢測突變的基礎喔！
- 學習心得：這題確實很棒，難度屬於 medium。它不只考你是不是認識這個技術的名字，更重要的是，它引導你思考 DNA 的熱穩定性 ($T_m$) 如何與 層析的親和力 產生物理化學上的連結。這種思維方式在臨床分子生物學裡非常重要，能幫助你未來更好地理解和應用各種檢測方法。你答對了，代表你對這些核心觀念的掌握度很高，真的很替你開心！