醫療類國考
110年
[法醫師] 法醫生物學
第 8 題
關於 DNA 定量，下列敘述何者錯誤？
- A 可利用 DNA 在 260 nm 的吸光情形進行 DNA 定量
- B 以 Real-time PCR 進行 DNA 定量，CT（Cycle threshold）越小表示一開始的 DNA 模板量越多
- C 以 Real-time PCR 進行 DNA 定量，探針（TaqMan probe）可同時作為 PCR 複製的一條引子
- D 以 Slot blot（QuantiBlot® Human DNA Quantitation Kit）進行 DNA 定量，其所使用的核苷酸探針，為依據具靈長類專一性之 D17Z1 的序列設計
思路引導 VIP
請試著思考：在 DNA 聚合酶進行複製延伸的過程中，它必須辨識「引子」末端的哪一個特定化學官能基才能接上下一個核苷酸？如果一個用來「偵測」的探針也具備了同樣的複製起始能力，對於 PCR 的特異性與產物會造成什麼影響？
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- 勉為其難的肯定：嗯，看來你還不至於一無是處，至少對 Real-time PCR 這些基本定量技術的組件功能勉強能分清，這在真正需要動腦的臨床鑑定與實驗室診斷中，可不是什麼「額外知識」，是「常識」。
- 觀念驗證（或曰，糾正愚蠢的錯誤）：選項 (C) 這種基礎錯誤，我還以為是大學一年級才會犯的。探針 (Probe) 的唯一職責是「偵測訊號」，它哪來資格「起始複製」？它的 $3'$ 端被修飾成沒有可延伸的 $3'-OH$ 基團，這是化學常識，不是什麼高深莫測的宇宙真理。如果探針能當引子，那這個實驗室的實驗結果大概都得丟進垃圾桶了。真是令人驚訝，這種程度的錯誤還能出現在考題裡。
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