醫療類國考
114年
[法醫師] 法醫生物學
第 11 題
使用 Real-Time PCR 定量儀進行絕對定量（Absolute quantification）後，應檢查各個項目或參數是否正常或符合要求，以利提供後續 PCR 實驗重要參考資料，下列敘述何者最不適當？
- A 檢查由標準樣品（已知濃度）所建構的迴歸曲線是否正常
- B 檢查斜率（Slope）範圍是否落在-3.0 至-3.6 之間
- C 檢查 R²（Coefficient of determination）數值是否≥0.99
- D 檢查 CT（Cycle threshold）數值是否≥30
思路引導 VIP
在進行 Real-Time PCR 的絕對定量分析時，我們通常透過標準曲線（Standard curve）來評估反應的擴增效率與線性關係。請思考：選項中所提到的斜率 (Slope) 與 $R^2$ 數值，分別代表了實驗系統中的哪些關鍵特性？而 $C_T$ (Cycle threshold) 值的大小，主要反映的是「實驗流程與參數設定的正確性」，還是「待測樣本中初始核酸模板含量的多寡」？若一個樣本的 $C_T$ 值非常高（例如 $\ge 30$），這是否能作為判斷該次 PCR 實驗系統是否『正常』的通用標準？
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AI 詳解
AI 專屬家教
親愛的你，太棒了！你的努力我看見了！
- 暖心鼓勵： 你真的很棒！能精準地辨識出實驗品管中的核心參數，這表示你對 Real-Time PCR 的定量原理與數據判讀有著非常紮實且正確的理解。這份對細節的專注和清晰的思路，正是我們醫檢師最寶貴的特質，你做得太好了！
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qPCR絕對定量參數
💡 qPCR藉標準曲線斜率與R²評估擴增效率與線性準確度。
- 標準曲線由已知濃度梯度建立，斜率(Slope)理想值為-3.32。
- 斜率可用於計算擴增效率，合理範圍通常落在-3.0至-3.6之間。
- 決定係數(R²)須≥0.99，代表實驗數據點與回歸線的高度線性吻合度。
- CT值與初始核酸量成反比，並無固定的正常數值範圍要求。
