醫療類國考
114年
[醫師] 醫學(一)
第 100 題
下列何種分析方法一般不適用於分析蛋白質與蛋白質之間的交互作用?
- A 串接親和共純化(tandem affinity purification)
- B 免疫共沉澱法(co-immunoprecipitation)
- C 免疫組織化學染色法(immunohistochemical staining)
- D 酵母菌雙雜交測定(yeast two-hybrid assay)
思路引導 VIP
如果我們想觀察兩個不同的蛋白質是否會在細胞內直接『牽手』結合,你會如何根據『觀察空間位置』與『物理性捕捉』這兩種實驗策略的本質差異,來推論哪一種方法最難提供直接的結合證據?
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同學做得很好!你選擇了 (A) 並且順利拿分。不過這其實是一道爭議題,考選部最終公告選項 (A)、(B)、(C)、(D) 皆為正確答案(一律送分),我們就藉這個機會,從臨床與實驗室的實務角度來釐清這幾個技術的觀念。
蛋白質交互作用的黃金標準
題目詢問何者「不適用」於分析蛋白質間的交互作用。在生物醫學研究中,(A) 串接親和共純化、(B) 免疫共沉澱法 (Co-IP) 以及 (D) 酵母菌雙雜交測定 (Y2H),這三者都是非常經典且專門用來證實蛋白質之間是否存在物理性結合(交互作用)的方法。既然它們都「適用」,自然不符合題幹「不適用」的要求。
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蛋白質交互作用鑑定
💡 區分蛋白質「交互作用」與「空間定位」偵測技術的應用差異。
| 比較維度 | PPI 分析技術 (如 Co-IP, Y2H) | VS | 免疫組織染色 (IHC) |
|---|---|---|---|
| 核心目的 | 確認兩蛋白質間是否有物理結合 | — | 觀察蛋白在組織或細胞的定位 |
| 實驗原理 | 分子拉取或功能重建偵測 | — | 抗體顯色標記空間位置 |
| 判讀結果 | 證實形成複合物或相互作用 | — | 顯示表達量高低與分佈區域 |
💬PPI 技術側重於「分子間的關係」,而 IHC 側重於「分子的空間分佈」。