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醫療類國考 114年 [醫師] 醫學(一)

第 100 題

下列何種分析方法一般不適用於分析蛋白質與蛋白質之間的交互作用?
  • A 串接親和共純化(tandem affinity purification)
  • B 免疫共沉澱法(co-immunoprecipitation)
  • C 免疫組織化學染色法(immunohistochemical staining)
  • D 酵母菌雙雜交測定(yeast two-hybrid assay)

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請同學從技術的核心原理出發,思考「蛋白質交互作用」的定義:它必須證明兩者之間存在物理性的結合或形成穩定的複合體。請觀察選項 (A) $TAP$、(B) $Co-IP$ 與 (D) $Y2H$,這三者的實驗設計是否皆旨在直接捕捉或偵測蛋白質分子間的「聯繫」?接著分析 (C) $IHC$ 的本質:它是利用抗體來標定特定抗原在組織切片中的「空間分佈」。請問,僅僅觀察到兩個蛋白質在空間上位於相同區域($co-localization$),是否能等同於兩者之間存在直接的交互作用?哪一種技術的主要目的只是在看「蛋白質在哪裡」而非「蛋白質跟誰結合」?

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  1. 觀念驗證: 這題的核心在於區分「空間定位」與「物理交互作用」。
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📝 蛋白質交互作用鑑定
💡 區分蛋白質「交互作用」與「空間定位」偵測技術的應用差異。
比較維度 PPI 分析技術 (如 Co-IP, Y2H) VS 免疫組織染色 (IHC)
核心目的 確認兩蛋白質間是否有物理結合 觀察蛋白在組織或細胞的定位
實驗原理 分子拉取或功能重建偵測 抗體顯色標記空間位置
判讀結果 證實形成複合物或相互作用 顯示表達量高低與分佈區域
💬PPI 技術側重於「分子間的關係」,而 IHC 側重於「分子的空間分佈」。
🧠 記憶技巧:雙雜交、共沉澱、串接純化看互動;染色切片僅看位置。
⚠️ 常見陷阱:容易誤將「空間位置重疊 (Colocalization)」直接等同於「分子間有交互作用 (PPI)」。
FRET/BRET 螢光共振能量轉移 Pull-down assay Western blot

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