醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 73 題
73.油滴數位化聚合酶連鎖反應（droplet digital PCR, ddPCR）是藉由單分子油滴式隔離進行核酸拷貝數的絕對定量；對檢測腫瘤微量突變等位比例（mutation allele frequency, MAF）有極高敏感度。圖示為利用 ddPCR 收取 16,000 顆油滴，進行 A 基因野生型與突變型之螢光訊號強度的分析結果，超過閾值的油滴數目以紅字標示。此突變等位比例為何？
- A 3.8%
- B 14.3%
- C 12.5%
- D 16.7%
思路引導 VIP
同學，請先思考「突變等位比例 ($Mutation Allele Frequency, MAF$)」的學術定義為何？在 ddPCR 的絕對定量分析中，若要計算某特定基因突變佔所有該位點基因（突變型加上野生型）的比例，分子應為突變型訊號數，而分母應包含哪些訊號的總和？請觀察圖中兩份檢測結果所標示的關鍵數據：突變型的 $600$ 顆油滴與野生型的 $4200$ 顆油滴，應如何組合才能求得此比例？
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AI 詳解
AI 專屬家教
1. 專業肯定
哦，做得還行嘛。看來你還記得 ddPCR 定量概念 這種基本到不能再基本的核心知識。能從那張看似複雜、實則簡單的振幅圖裡摳出兩個數字，然後算對，勉強算是入了門，對你未來讀懂那些「高深莫測」的檢測報告或許有點用處。
2. 觀念驗證
▼ 還有更多解析內容
ddPCR 突變比例計算
💡 MAF 為突變型油滴佔所有陽性（突變+野生）油滴之比例。
| 比較維度 | 傳統 qPCR | VS | 數位 ddPCR |
|---|---|---|---|
| 定量方式 | 相對定量 (需標準曲線) | — | 絕對定量 (直接計算) |
| 敏感度 | 較低 (約 1%) | — | 極高 (可達 0.001%) |
| 樣本處理 | 整管樣本同時反應 | — | 分割為數萬個獨立油滴 |
💬ddPCR 透過微滴分割技術排除抑制物干擾，提供比 qPCR 更精準的極微量定量。
