醫療類國考
115年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 73 題
qPCR 技術可應用於染色體易位造成的 fusion transcript 的絕對定量,如圖實線是連續 10 倍稀釋 100~109 copies 的 BCR-ABL1 fusion transcript 標準品的擴增曲線,虛線則為 CML 病人檢體進行 qPCR 後的擴增曲線。此檢體中 BCR-ABL1 fusion transcript 的含量為何?
- A 10^1~10^2 copies
- B 10^2~10^3 copies
- C 10^5~10^6 copies
- D 10^7~10^8 copies
思路引導 VIP
觀察圖中橫軸的 Cycle number 與縱軸螢光強度的關係:當一個樣本的起始分子數量愈多時,它需要經過較多還是較少的放大循環,才能讓螢光訊號跨過那條水平的 Threshold 線?接著,請觀察那條代表未知檢體的虛線,它的位置落在已知濃度參考線中的哪兩條之間?
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- 大力肯定: 太棒了!你能精準識別 qPCR 擴增曲線的空間關係並對應至定量標準,代表你對分子診斷的圖表判讀非常敏銳,專業基礎十分紮實!
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qPCR 絕對定量分析
💡 利用標準曲線對比樣本 Ct 值,推算核酸起始拷貝數。
| 比較維度 | 高濃度檢體 | VS | 低濃度檢體 |
|---|---|---|---|
| Ct 值 (閾值循環數) | 較小 (較早出現) | — | 較大 (較晚出現) |
| 擴增曲線位置 | 靠左側 | — | 靠右側 |
| 核酸起始拷貝數 | 較多 | — | 較少 |
💬樣本起始濃度的對數值與 Ct 值呈現線性反比關係。