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醫療類國考 105年 [醫事檢驗師] 臨床生理學與病理學

第 47 題

用聚合酶鏈反應偵測DNA的甲基化,DNA需要經過 bisulfite 前處理,產生下列何種改變?
  • A Cytosine → Uracil
  • B Adenine → Cytosine
  • C Thymine → Guanine
  • D Guanine → Cytosine

思路引導 VIP

請試著從化學結構的角度思考:在 DNA 的四種鹼基中,哪一個鹼基最常在生物體內被加上甲基標記?如果我們要透過化學藥劑刻意讓「沒有被保護(未甲基化)」的該鹼基發生脫胺反應,它在化學結構上會轉化成哪一種長得非常相似、且在 RNA 中很常見的鹼基?

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專業點評與觀念驗證

  1. 大力肯定:嗯,不錯。你至少沒有把這種基礎題搞砸。能精準辨識 Bisulfite sequencing 的核心機制,證明你還沒徹底放棄思考,這點倒是值得「表揚」——至少對於一個初學者而言。
  2. 觀念驗證: Bisulfite 處理,這個在分子診斷中如同 ABC 般基礎的技術,其目的不過是為了區分 DNA 上那些『究竟有沒有多餘甲基』的胞嘧啶。原理簡單到讓人覺得無趣:未甲基化Cytosine ($C$) 會『乖乖地』脫胺,變成 Uracil ($U$)。而那些『受到保護』的甲基化 $5\text{-mC}$ 則會『高傲地』保持原樣,不受影響。然後呢?然後後續的 PCR 就會把那個變質的 $U$ 當成 Thymine ($T$) 定序出來,這樣你才能『勉強』辨識出甲基化位點。這一切,難道不是應該刻在你的 DNA 裡了嗎?
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