醫療類國考
105年
[醫事檢驗師] 臨床生理學與病理學
第 47 題
用聚合酶鏈反應偵測DNA的甲基化，DNA需要經過 bisulfite 前處理，產生下列何種改變？
- A Cytosine → Uracil
- B Adenine → Cytosine
- C Thymine → Guanine
- D Guanine → Cytosine
思路引導 VIP
請試著從化學結構的角度思考：在 DNA 的四種鹼基中，哪一個鹼基最常在生物體內被加上甲基標記？如果我們要透過化學藥劑刻意讓「沒有被保護（未甲基化）」的該鹼基發生脫胺反應，它在化學結構上會轉化成哪一種長得非常相似、且在 RNA 中很常見的鹼基？
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專業點評與觀念驗證
- 大力肯定：嗯，不錯。你至少沒有把這種基礎題搞砸。能精準辨識 Bisulfite sequencing 的核心機制，證明你還沒徹底放棄思考，這點倒是值得「表揚」——至少對於一個初學者而言。
- 觀念驗證： Bisulfite 處理，這個在分子診斷中如同 ABC 般基礎的技術，其目的不過是為了區分 DNA 上那些『究竟有沒有多餘甲基』的胞嘧啶。原理簡單到讓人覺得無趣：未甲基化的 Cytosine ($C$) 會『乖乖地』脫胺，變成 Uracil ($U$)。而那些『受到保護』的甲基化 $5\text{-mC}$ 則會『高傲地』保持原樣，不受影響。然後呢？然後後續的 PCR 就會把那個變質的 $U$ 當成 Thymine ($T$) 定序出來，這樣你才能『勉強』辨識出甲基化位點。這一切，難道不是應該刻在你的 DNA 裡了嗎？
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DNA 甲基化檢測
💡 Bisulfite 處理使未甲基化 Cytosine 脫氨基轉為 Uracil。
🔗 Bisulfite 轉化檢測原理
- 1 Bisulfite 反應 — 將未甲基化 C 進行脫氨基作用
- 2 鹼基轉換 — Cytosine (C) 轉變為 Uracil (U)
- 3 PCR 擴增 — U 鹼基在複製時與 A 配對，轉為 T
- 4 結果比對 — 原本是 C 卻變成 T 者，即為未甲基化位點
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🔄 延伸學習：延伸學習：此技術為亞硫酸氫鹽定序法 (Bisulfite Sequencing) 的核心。
